专利类型：发明授权

申请(专利)号：ZL 2010 1 0239919.8

授权公告日：2013-01-02

申请人：中国林业科学研究院热带林业研究所

发明人：甘四明; 李发根; 翁启杰; 李梅; 周长品; 于晓丽

摘要：本发明提供了一种基于荧光dUTP的自动检测SSR分子标记的方法,包括以下步骤：(1)配制PCR反应体系：取1.0μL 10×buffer、dNTP 25～50μM、MgCl-(2)2.0mM、前向引物0.5μM、后向引物0.5μM、Taq酶1个单位、荧光dUTP10pmol和基因组DNA 5ng混合,加超纯水补至10μL；(2)进行降落PCR：94℃4min；20个循环：94℃30s、70～60℃或者66～56℃30s且每个循环降低0.5℃、72℃1min；再26个循环：94℃30s、60或者56℃30s、72℃1min；最后72℃10min,得PCR产物；(3)取PCR产物1.0μL加入9.34μL超纯甲酰胺、0.16μL分子量内标,95℃5min后放置冰上快速冷却,在测序仪上进行标记检测。